Спросить
Войти
УДК 575.174.015.3:631.529:634.511 DOI: 10.24411/1816-1863-2020-12021
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ СЕМЕННОГО ПОТОМСТВА
ДЕРЕВЬЕВ ОРЕХА ГРЕЦКОГО (JUGLANS REGIA L.) ПРИ ИНТРОДУКЦИИ В ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ
С. С. Карпова, к.б.н, преподаватель, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный институт физической культуры» (ВГИФК), karpovass@mail.ru, Воронеж, Россия, Ф. Р. Х. Аль-Хачами, аспирант, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (ВГУ), firasrahy@gmail.com, Воронеж, Россия, В. Н. Калаев, д.б.н, профессор, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (ВГУ), Dr_Huixs@mail.ru, Воронеж, Россия, И. В. Игнатова, преподаватель, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (ВГУ), irina777.84@list.ru, Воронеж, Россия, В. А. Славский, к. с/х. н., доцент, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный лесотехнический университет им. Г. Ф. Морозова» (ВГЛТУ), Vasiliy1980@mail.ru, Воронеж, Россия
Проведено изучение цитогенетических характеристик (митотической активности, времени прохождения клетками стадий митоза, уровня и спектра патологических митозов, частоты встречаемости клеток на стадии мета-, ана-, телофазы митоза с остаточным ядрышком, площади поверхности одиночных ядрышек и частоты встречаемости клеток с различными типами ядрышек) семенного потомства деревьев интродуцента — ореха грецкого (Juglans regia L.), длительное время произрастающих на территории Воронежской области. Выявлены высокие (более 25 %) и средние (11—25 %) значения коэффициентов вариации для большинства изученных цитогенетических показателей, что свидетельствует о высокой гетерогенности семенного потомства. Установлено наличие трех различающихся по цитогенетическим характеристикам полиморфных групп проростков — мутабильной (с высоким уровнем патологических митозов), слабомутабиль-ной (с низким уровнем цитогенетических нарушений) и промежуточной. Показаны различия выделенных групп по показателям митотической активности, частоты и спектра патологических митозов. Обсуждаются механизмы поддержания цитогенетического гомеостаза в мутабильной и слабомутабильной группах за счет изменения ядрышковых характеристик в неделящихся клетках и появления остаточных ядрышек на различных стадиях митоза. Установлены размеры выделенных групп проростков: 7,5 % от общего числа проанализированных проростков относятся к мутабильной группе, 22,5 % — к слабомутабильной. Промежуточная группа включает 70 % от всех изученных проростков и характеризуется переходными значениями цитогенетических показателей между слабомутабильной и мутабильной группами проростков. Качественные и количественные характеристики выделенных групп свидетельствуют о высокой степени адаптации материн -ских деревьев интродуцента — ореха грецкого к условиям произрастания в Воронежской области.
The study of cytogenetic characteristics in walnut (Juglans regia L.) seed plantlets of introduced trees, which have been growing for a long time on the territory of the Voronezh region, was made. High (more than 25 %) and average (11—25 %) values of coefficients of variation for the majority of studied cyto-genetic indicators were revealed, which indicates a high heterogeneity of seed progeny. There were three polymorphic groups of seedlings according to cytogenetic characteristics: mutable (with a high level of pathological mitosis), low-mutable (with a low level of cytogenetic disorders) and intermediate. The differences between these groups were shown in terms of mitotic activity, frequency and spectrum of pathological mitoses. The mechanisms of maintaining cytogenetic homeostasis in mutable and low-mutable groups due to changes in nucleolar characteristics in non-dividing cells and the appearance of persistent nucleoli at various stages of the mitosis were discussed. The sizes of the selected groups of seedlings were determined: 7.5 % of the total number of analyzed seedlings belong to the mutable group, 22.5 % — to the low-mutable group. The intermediate group includes 70 % of all studied seedlings and is characterized by transitional values of cytogenetic parameters between the low-mutable and mutable groups of seedlings. The qualitative and quantitative characteristics of the observed groups indicate a high degree of adaptation of the introduced walnut mother trees to the growing conditions in the Voronezh Region.
О S Lû
Введение
Проблема оценки успешности интродукции древесных растений д о сих пор остается одной из ведущих в современной дендрологии и селекции. Как правило, такая оценка производится по морфологическим и физиологическим показателям растений: учитываются их ростовые качества, устойчивость к изменению температурного и водного режимов, выявляются изменения в прохождении фенофаз и т.п. [1—3]. О хорошей приспособленности растений свидетельствует их способность к плодоношению и высокое качество семян [4]. Одновременно с этим адаптация популяций растений обусловливается величиной полиморфизма признаков, которые подвергаются отбору [5]. Следовательно, изучение цитогенетического полиморфизма семенного потомства интродуци-рованных древесных растений позволит решить сразу две задачи: с одной стороны, оценить качество семенного материала по уровню нарушений клеточного деления и состоянию синтетического аппарата интерфазных клеток проростков, а с другой стороны — оценить степень адаптации материнских растений к новым условиям существования [6, 7].
Ранее проводилось изучение вариабельности цитогенетических характеристик в семенном потомстве лиственных лесооб-разующих пород Центрального Черноземья — дуба черешчатого (Quercus robur L.) и березы повислой (Betula pendula Roth) [8—12]. Было показано, что условия произрастания материнских деревьев оказывают влияние на изменения цитогенети-ческих показателей в семенном потомстве данных видов растений: в неблагоприятных условиях может наблюдаться усиление или депрессия митотической активности, возрастает доля клеток с патологическими митозами и расширяется их спектр, изменяется синтетическая активность ядрышек. В семенном потомстве указанных аборигенных видов древесных растений выявлен цитогенетический полиморфизм, заключающийся в существовании нескольких групп проростков с разным уровнем стабильности генетического
материала (мутабильная, слабомутабиль-ная и одна или несколько промежуточных групп). Подобные исследования были проведены и для рододендрона Ледебура (Rhododendron ledebourii Pojark.), являющегося интродуцентом Центрального Черноземья [13]. Кроме того, при изучении цитогенетического полиморфизма дуба черешчатого было установлено, что проростки из группы с высоким уровнем ци-тогенетических нарушений и низкой яд-рышковой активностью обладали худшими ростовыми показателями [11].
Орех грецкий (Juglans regia L.), являясь одной из ценнейших интродуцированных орехоплодных культур в России, успешно произрастает и стабильно плодоносит на территории Воронежской области [14]. Однако с позиций цитологии и генетики данный вид практически не изучен. Учитывая изложенное выше, целью нашего исследования явилось выделение и описание полиморфных групп по цитогенети-ческим показателям семенного потомства деревьев ореха грецкого для оценки уровня адаптации материнских деревьев к условиям произрастания на территории Воронежской области и перспективности использования семенного материала для целей селекции новых форм ореха грецкого, приспособленных к новым условиям обитания.
Материалы и методы
Для проведения эксперимента были отобраны фенотипически нормальные деревья ореха грецкого семенного происхождения в возрасте 30—40 лет, произрастающие на частном приусадебном участке в г. Воронеже (51°42&44&& северной ш ироты; 39°12&3&& (39°13&52&&) восточной долготы, высота над уровнем моря — 156 м). Почва в месте произрастания — обыкновенный чернозем, глубина залегания грунтовых вод — 8,5—9 м. Маточное д ерево этой формы произрастает в Звенигорском районе Киевской области (Украина).
Плоды ореха урожая 2017 г. в количестве 200 штук не подвергали стратификации и проращивали во влажном песке. Фиксацию проростков и изготовление
микропрепаратов проводили по общепринятой методике в 9 ч утра [8]. На микроскопе Laboval-4 (Carl Zeiss, Jena) было просмотрено 40 микропрепаратов (1 проросток — 1 микропрепарат), при этом на каждом из них учитывали общее количество просмотренных клеток (не менее 700), отмечали количество клеток на различных стадиях митоза, количество и тип аномально делящихся клеток (в соответствии с классификацией Алова [15]), количество клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы, анафазы, телофазы. Затем вычисляли (в %) митотический индекс, долю патологических митозов, долю каждого типа нарушений клеточного деления и долю клеток с остаточными ядрышками в митозе.
Для изучения ядрышковых характеристик в клетках меристемы корня проростков ореха грецкого на каждом препарате в 200 клетках с помощью насадки-микрометра измеряли диаметр ядрышек и высчитывали площади поверхности ядрышек (мкм2); учитывали количество клеток с одним и двумя ядрышками и вычисляли их долю (%); определяли долю (%) ядрышек различных типов по классификации, предложенной Челидзе и Зацепиной [16].
Статистическую обработку д анных проводили с использованием пакета статистических программ Stadia 7.0 Professional. Процедура обработки данных изложена в работе Калаевой с соавт. [17].
Кластерный анализ проводили с использованием метрики нормированный Эвклид, стратегия группировки группового соседа. В матрицу данных вносили все изученные цитогенетические показатели. Правильность классификации проростков и отнесения их в ту или иную группу была подтверждена результатами дискрими-нантного анализа с использованием критерия Махаланобиса. Сравнение групп проростков проводили по непараметрическому Х-критерию рангов Ван-дер-Варде-на (для показателей частоты встречаемости остаточных ядрышек и патологических
Таблица 1
Цитогенетические характеристики семенного потомства деревьев ореха грецкого,
произрастающих в г. Воронеже
Среднее значение Пределы варьирова- КоэффициЦитогенетические показатели ния (95 %-й доверительный интервал) ент вариации (Cv), %
Митотический индекс, % 5,8 ± 0,4 от 5,0 до 6,5 39,7
Митотический индекс без учета клеток на стадии 3,8 ± 0,3 от 3,2 до 4,3 44,7
профазы, %
Доля клеток (%) на стадии
профазы 34,5 ± 2,5 от 29,6 до 39,6 45,7
метафазы 18,1 ± 1,4 от 15,4 до 20,9 47,5
анафазы-телофазы 47,4 ± 1,9 от 44,0 до 51,5 24,7
Уровень патологий митоза, % 6,0 ± 0,8 от 4,4 до 7,6 83,3
Уровень патологий митоза без учета клеток на 9,1 ± 1,1 от 6,9 до 11,3 78,0
стадии профазы, %
Частота встречаемости клеток с остаточными 0,6 ± 0,2 от 0,2 до 1,0 87,8
ядрышками в митозе, %
Частота встречаемости ядрышек различных
типов, %
«кора—сердцевина» 66,7 ± 3,0 от 60,7 до 72,3 62,5
«кора—сердцевина» с вакуолью 30,2 ± 3,0 от 24,3 до 36,1 29,0
вакуолизированных 0,2 ± 0,1 от 0 до 0,4 373,7
компактных 3,0 ± 1,2 от 0,6 до 5,4 254,2
Площадь поверхности ядрышек в клетках 85,5 ± 2,0 от 81,7 до 89,4 14,5
с 1 ядрышком в ядре, мкм2 Площади ядрышек различных типов, мкм2
«кора—сердцевина» 81,1 ± 1,7 от 77,8 до 84,3 18,8
«кора—сердцевина» с вакуолью 101,7 ± 3,0 от 95,8 до 107,6 13,1
вакуолизированных 74,6 ± 2,5 от 73,1 до 76,2 6,7
компактных 36,6 ± 3,1 от 32,8 до 40,4 33,6
Частота встречаемости клеток с двумя и более 2,3 ± 0,2 от 1,9 до 2,7 59,0
ядрышками в ядре, %
й а о о К а
Мутабильная группа
Промежуточная группа
Слабомутабильная группа
Рис. 1. Дендрограмма кластерных расстояний между проростками семенного потомства деревьев ореха грецкого, построенная на основе их цитогенетических характеристик
митозов) и по параметрическому ^критерию Стьюдента (для показателей митоти-ческой активности и ядрышковых характеристик). Для определения корреляционных зависимостей использовали коэффициент корреляции рангов Спирмена (г8). Коэффициент вариации считали согласно рекомендациям Лакина (1990).
Результаты и обсуждение
Значения цитогенетических показателей в корневой меристеме проростков ореха грецкого представлены в таблице 1. Учитывая тот факт, что практически все указанные показатели семенного потомства ореха грецкого отличаются средними (от 11 до 25 %) и высокими значениями коэффициента вариации (более 25 %) (табл. 1), нами был проведен кластерный анализ данных, который позволил выявить наличие трех групп проростков. Ден-дрограмма кластерных расстояний, построенная на основе изученных цитогенети-ческих характеристик, приведена на рисунке 1.
Дискриминантный анализ подтвердил правильность отнесения проростков к выделенным группам (Р < 0,01). Цитогене-тические показатели семенного потомства ореха грецкого в выделенных группах проростков представлены в таблице 2.
Основным критерием выделения указанных групп явилась частота встречаемости патологических митозов, которые зачастую обусловливают возникновение клеток с несбалансированными кариоти-пами, т. е. приводят к развитию мутаций и анеуплоидий [14]. Поэтому группу, в которой отмечается высокий уровень патологических митозов (13,7 ± 3,6 %), возможно считать «мутабильной», а группу с низкими значениями этого показателя (1,3 ± 0,4 %) — «слабомутабильной».
В группе проростков с высоким уровнем цитогенетической нестабильности отмечается низкий показатель митотичес-кой активности, при этом, как видно из таблицы 2, между выделенными группами проростков отсутствуют различия по показателю «митотический индекс без учета профазных клеток». Таким образом, снижение количества делящихся клеток в му-табильной группе проростков происходит за счет сокращения доли профаз. Ускоренное прохождение стадии профазы в этой группе проростков по сравнению с двумя другими позволяет выдвинуть предположение об имеющихся на этой стадии
нарушениях процессов формирования веретена деления и/или процесса компак-тизации хромосом. Оба этих процесса и приводят к появлению высокого ч исла патологических митозов с преобладанием в спектре отставаний хромосом (86,6 %) (рис. 2).
В мутабильной группе проростков обнаружены также наибольшие значения клеток с остаточными ядрышками в м ито-зе, что, возможно, свидетельствует об усилении активности рибосомальных генов в клетках меристемы в условиях недостаточного функционирования ядрышкового аппарата в интерфазе. Высокие показатели указанного критерия были также обнаружены в мутабильной группе проростков при изучении цитогенетического полиморфизма у другого интродуцента Воронежской области — рододендрона Леде-бура. Данный феномен рассматривается как частный случай усиления ядрышко-вой активности и является адаптационным механизмом, обеспечивающим приспособление организма к неблагоприятным условиям среды [13, 19].
В мутабильной группе проростков имеется весь спектр описанных для проростков ореха грецкого типов ядрышек. Только в этой группе проростков встречались вакуолизированные ядрышки с низким уровнем синтетической активности, а доля высокоактивных ядрышек типа кора— сердцевина имеет наименьшие по сравнению с другими группами значения. Это, по-видимому, свидетельствует о недостаточном уровне ядрышковой активности в интерфазных клетках. Поэтому расширение спектра типов ядрышек в данной группе за счет увеличения доли компактных ядрышек с максимальной синтетической активностью можно рассматривать в качестве компенсаторного механизма, восполняющего недостаточную метаболическую активность в меристеме данной группы проростков.
Таблица 2
Цитогенетические характеристики различных по мутабильности групп проростков
ореха грецкого
Мутабильная Промежуточная Слабомута-бильная
Цитогенетические показатели
Количество проростков в группе, шт. Митотический индекс, %
Митотический индекс без учета профазных клеток, % Доля клеток на стадии митоза, % профаза метафаза анафаза-телофаза Уровень патологических митозов, % Уровень патологических митозов без учета профаз-ных клеток, %
Частота встречаемости клеток с остаточными ядрышками в митозе, %
Площадь поверхности ядрышек, мкм2 одиночных
«кора—сердцевина» с вакуолью «кора—сердцевина» вакуолизированных компактных Доля ядрышек, %
«кора—сердцевина» с вакуолью «кора—сердцевина» вакуолизированных компактных
Доля интерфазных клеток (%) с 2 ядрышками в ядре
Примечания:
а различия со слабомутабильной группой достоверны (Р < 0,05); б различия с промежуточной группой достоверны (Р < 0,05).
Мутабильная Промежуточная Слабомутабильная
группа группа группа
Рис. 2. Спектр патологических митозов в различных по мутабильности генетического аппарата
группах проростков ореха грецкого
■ редкие патологии
□ агглютинации в метафазе ^ мосты
□ отставания в анафазе
□ отставания в метакинезе
В слабомутабильной группе проростков отмечается повышенное количество клеток на стадии профазы, что, по-видимому, связано с прохождением точек сЬескрош!-репарации, приводящих к сокращению аномальных клеточных делений [12]. Кроме того, увеличение числа д елящихся клеток в данной группе проростков можно рассматривать как компенсаторный механизм, обеспечивающий большую устойчивость проростков, так как именно объем меристем определяет качественные и количественные характеристики развития целого организма [20].
О компенсаторной роли остаточных ядрышек в митозе, которая заключается в поддержании синтеза необходимых клетке белков в стрессовых условиях (условиях интродукции) и тем самым, возможно, ведет к снижению частоты встречаемости патологий митоза, свидетельствует отрицательная корреляционная связь, выявленная в слабомутабильной группе проростков между частотой встречаемости патологических м итозов и ч астотой встречаемости клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза (г8 = -0,36, Р < 0,05).
В спектре патологических митозов (рис. 2) в слабомутабильной группе проростков увеличена доля мостов, по сравнению с другими группами, что свидетельствует об усилении репаративных процессов в этой группе [21].
Для слабомутабильной группы проростков характерно отсутствие компактных и вакуолизированных ядрышек в интерфазных клетках, однако количество клеток с двумя ядрышками в ядре максимально по сравнению с другими группами проростков. Наибольшие значения интерфазных клеток с двумя и более ядрышками в ядре при изучении цитогенетического полиморфизма отмечались также в слабомута-бильной группе проростков деревьев березы повислой, произрастающих в естественных и искусственных древостоях на территории Воронежской области. Увеличение числа двуядрышковых и много -ядрышковых интерфазных клеток отражает механизмы поддержания синтетической активности на стабильном уровне в меристеме проростков слабомутабильной группы [10].
Обобщенные характеристики мута-бильной и слабомутабильной групп представлены в таблице 3.
Требуется отметить, что мутабильная группа составила всего 7,5 % от общего количества проанализированных проростков, т. е. незначительное количество проростков обладают потенциально низкими качествами для роста и развития. На долю слабомутабильной группы пришлось
Таблица 3
Обобщенные характеристики мутабильной и слабомутабильной групп проростков семян и деревьев ореха грецкого в условиях интродукции в Воронежской области §
Цитогенетические показатели Мутабильная группа Слабомутабильная группа
Митотический индекс, % Уровень патологических митозов, % Спектр патологических митозов, % Доля вакуолизированных ядрышек, % Доля компактных ядрышек, % Доля интерфазных клеток с двумя и более ядрышками в ядре, % Низкое значение (3,7 ± 0,9) Высокое значение (13,7 ±3,6) Преобладание отставаний хромосом (86,6) Наибольшее значение (2,4 ± 0,7) Наибольшее значение (22,9 ± 10,0) Среднее значение (2,2 ± 0,4) Высокое значение (6,7 ± 0,7) Низкое значение (1,3 ± 0,4) Увеличение доли мостов (33,3) Отсутствуют Отсутствуют Наибольшее значение (3,1 ± 0,5)
Выводы
Таким образом, опираясь на описанные выше цитогенетические показатели проростков ореха грецкого, можно сделать вывод о преимущественно стабильном протекании митоза в клетках корневой
меристемы проростков. Малое количество проростков с высоким уровнем цитогене-тических аномалий и преобладание проростков со средними и низкими значениями патологических митозов свидетельствует о высокой степени адаптации материнских деревьев интродуцента — ореха грецкого к условиям произрастания в Воронежской области. Проростки из промежуточной и слабомутабильной групп, вероятно, будут обладать преимуществами в ростовых качествах, по сравнению с проростками из мутабильной группы. Качественные и количественные данные, полученные в результате изучения цитогенети-ческого полиморфизма, могут послужить основой для разработки рекомендаций по совершенствованию системы семеноводства и селекции новых форм ореха грецкого.
Библиографический список
№2, 2020
плодоношенности дубравы] // Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. — Zagreb, 1997. —
С. 275-284.
CYTOGENETIC POLYMORPHISM OF WALNUT TREES (JUGLANS REGIA L.) SEED PROGENY DURING INTRODUCTION IN THE VORONEZH REGION
S. S. Karpova, PhD (Biology), lecturer, Voronezh State Institute of Physical Training (VSIPT), karpovass@mail.ru, Voronezh, Russia,
F. R. H. Al-Hachami, postgraduate student, Voronezh State University (VSU), firasrahy@gmail.com, Voronezh, Russia,
V. N. Kalaev, PhD (Biology), Dr. Habil, professor, Voronezh State University (VSU), Dr_Huixs@mail.ru, Voronezh, Russia,
I. V. Ignatova, lecturer, Voronezh State University (VSU), irina777.84@list.ru, Voronezh, Russia,
V. A. Slavskiy, PhD (Agriculture), associate professor, Voronezh State University of Forestry and Technologies named after G. F. Morozov (VSUFT), Vasiliy1980@mail.ru, Voronezh, Russia
References
Taran S. S., Kolganova I. S. Metodologicheskie aspekty otsenki rezul&tatov introduktsii drevesnyh rastenij dlya tselej ozeleneniya [Methodological aspects of evaluating the results of introduction of woody plants for landscaping purposes] // Fundamental&nye issledovaniya [Fundamental research]. 2013. No. 11 (9). P. 1892-1896 [in Russian].
Soltani G. A. Teoreticheskie podhody k ponimaniyu ustojchivosti drevesnyh rastenij pri introduktsii [Theoretical approaches to understanding the stability of woody plants during introduction] // Problemy i per-spektivy razvitiya sovremennoj landshaftnoj arhitektury, materialy Vserossijskoj nauchno-prakticheskoj konferencii s mezhdunarodnym uchastiem [Problems and prospects of development of modern landscape
architecture. Materials of the All-Russian Scientific and Practical Conference with International Participation]. 2017. P. 29—31 [in Russian].
Doroshenko T. N., Zaharchuk N. V., Ryazanova L. G. Adaptivnyjpotencialplodovyh rastenij yuga Rossii, monogr. [Adaptive potential of fruit plants in the South of Russia, monograph]. Krasnodar. 2010. 131 p. [in Russian].
Tushkanova O. V., Shekhmirzova M. D., Vasilenko A. S. Osobennostiplodonosheniya introducentov roda Juglans L. v usloviyah Adygei [Features of fruiting of introduced species of Juglans L. in Adygea] // Vestnik Majkopskogo gosudarstvennogo tekhnologicheskogo universiteta [Bulletin of the Maikop State Technological University]. 2010. Vol. 4. P. 39—44 [in Russian].
Volkova P. Yu., Geras&kin S. A. Polimorfizm antioksidantnyh fermentov v hronicheski obluchaemyh populy-aciyah sosny obyknovennoj [Polymorphism of antioxidant enzymes in chronically irradiated populations of common pine] // Ekologicheskaya genetika [Ecological genetics]. 2013. Vol. 11 (3). P. 48—62 [in Russian]. Butorina A. K. Sposob predvaritel&noj geneticheskoj otsenki otobrannyh plyusovyh derev&ev dlya sozdaniya klonovyh i semennyh plantatsij. Lesohozyajstvennaya informatsiya, rekomenduemaya dlya vnedreniya [Method for preliminary genetic evaluation of selected plus trees for creating clone and seed plantations. Forestry information recommended for implementation]. Moscow: VNIIC Lesresurs. 1989. Vol. 8. P. 8—12 [in Russian].
Zoldos V., Besendorfer V., Jelenic S., Lorkovic Z. J., Littvay T., Papes D. Cytogenetic damages as an indicator of pedunculate oak forest decline // Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. Zagreb. 1997. P. 275—284.
Butorina A. K., Kalaev V. N., Vostrikova T. V., Myagkova O. E. Citogeneticheskaya harakteristika semen-nogo potomstva nekotoryh vidov drevesnyh rastenij v usloviyah antropogennogo zagryazneniya goroda Voro-nezha [Cytogenetic characteristics of seed progeny of some species of woody plants under conditions of anthropogenic pollution in Voronezh] // Tsitologiya [Cytology]. 2000. Vol. 42 (2). P. 196—201 [in Russian]. Kalaev V. N., Butorina A. K. Cytogenetic effect of radiation in seed of oak (Quercus robur L.) trees growing on sites contaminated by Chernobyl fallout // Silvae Genetica. 2006. Vol. 55, No. 3. P. 93—101. Kalaev V. N., Karpova S. S., Artyukhov V. G. Cytogenetic characteristics of weeping birch (Betula pendula Roth) seed progeny in different ecological conditions // Bioremediation, Biodiversity and Bioavailability. 2010. Vol. 4, No. S1. P. 77—83.
Kalaev V. N., Popova A. A. Tsitogeneticheskie harakteristiki i morfologicheskiepokazateli semennogopotomstva derev &ev duba chereshchatogo (Quercus robur L.), proizrastayushchih na territoriyah s raznym urovnem antropogennogo zagryazneniya [Cytogenetic characteristics and morphological indicators of seed progeny of oak trees (Quercus robur L.) growing on territories with different levels of anthropogenic pollution] // Vestnik Voronezhskogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya Himiya. Biologiya. Farmaciya [Proceedings of Voronezh State University. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy]. 2014. Vol. 4. P. 63—72 [in Russian]. Kalaev V. N. Tsitogeneticheskie reaktsii listvennyh drevesnyh rastenij na stressovye usloviya i perspektivy ih ispol&zovaniya dlya otsenki genotoksichnosti okruzhayushchej sredy. [Cytogenetic reactions of deciduous woody plants to stressful conditions and prospects of their use for assessing the genotoxicity of the environment]. Voronezh: diss. dokt. biol. nauk [Voronezh: diss. doctor. biol. sciences]. 2009. 414 p. [in Russian].
Burmenko Yu. V., Baranova T. V., Kalaev V. N., Sorokopudov V. N. Citogeneticheskij polimorfizm se-mennogo potomstva introdutsentov na primere [Cytogenetic polymorphism of seed progeny of introduced plants on the example of Rhododendron ledebourii Pojark] // Rhododendron ledebourii Pojark. Turc-zaninowia. 2018. Vol. 21 (1). P. 164—173. doi: 10.14258/turczaninowia.21.1.16 [in Russian]. Slavskij V. A., Timashchuk D. A., Mironenko A. V. Rajonirovanie orekha gretskogo v Voronezhskoj oblasti po zonam ustojchivosti k neblagopriyatnym faktoram [Zoning of Juglans Regia in the Voronezh Region in the Zones of Resistance to Adverse Factors] // Lesotekhnicheskij zhurnal [Forestry Engineering journal]. 2017. Vol. 7 (3). P. 143—150 [in Russian].
Alov I. A. Tsitofiziologiya i patologiya mitoza [Cytophysiology and pathology of mitosis]. Moscow: Medicina. 1972. 264 p.
Chelidze V. P., Zatsepina O. V. Morfofunktsional&naya klassifikatsiya yadryshek [Morphofunctional classification of nucleoli] // Uspekhi sovremennoj biologii [Advances in modern biology]. 1988. Vol. 105 (2). P. 252—267 [in Russian].
Kalaeva E. A., Artyuhov V. G., Kalaev V. N. Teoreticheskie osnovy i prakticheskoe primenenie matemat-icheskoj statistiki v biologicheskih issledovaniyah i obrazovanii: uchebnik [Theoretical foundations and practical application of mathematical statistics in biological research and education: textbook]. Voronezh: Iz-datel&skij dom VGU. 2016. 282 p. [in Russian].
Lakin G. F. Biometrics [Biometriya]. Moscow: High School. 1990. 352 p. [in Russian]. Butorina A. K., Kosichenko N. E., Isakov Y. N., Pozhidaeva I. M. The effects of irradiation from the Chernobyl nuclear power plant accident on the cytogenetic behavior and anatomy of trees // Cytogenetic studies of forest trees and shrub species. Zagreb. 1997. P. 211—226.
Kosulina L. G. Fiziologiy ustojchivosti rastenij k neblagopriyatnym faktoram sredy [Physiology of plant resistance to adverse environmental factors]. Rostov-na-Donu: Izdatel&stvo Rostovskogo universiteta. 1993. 240 p. [in Russian].
Simakov E. A. O postradiatsionnom vosstanovlenii tsitogeneticheskih povrezhdenij v prorostkah semyan raznyh form kartofelya [About radiation recovery of cytogenetic damages in seed sprouts of different potato forms] // Radiobiologiya [Radiobiology]. 1983. Vol. 23 (5). P. 703—706 [in Russian].
